如何解決液相色譜儀中出峰異常問題
液相色譜儀系統(tǒng)由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相)內(nèi),由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),在兩相中作相對運動時,經(jīng)過反復多次的吸附-解吸的分配過程,各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別,被分離成單個組分依次從柱內(nèi)流出,通過檢測器時,樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來。然而在檢測過程中時有發(fā)生出峰異常的問題,那么遇到這類問題時該如何解決呢?
問題一:出峰不佳,峰分叉。
原因:(1) 色譜柱被污染; (2) 柱頭填料塌陷。
解決方法:處理對于第一種情況, 先用純水反向沖洗柱子, 然后換成甲醇沖洗, 接著用甲醇、異丙醇)沖洗柱子(沖洗時間的長短由樣品污染的情況而定) , 再換成甲醇沖洗, 然后用純水沖洗,最后甲醇沖洗正向沖洗柱子30 分鐘以上。如沖洗后依然出峰不佳,則考慮第二種情況。對于第二種情況,擰開柱頭,檢查柱填料是否硬結(jié)或塌陷。去除硬結(jié)部分(污染的填料) ,裝入新填料, 滴一滴甲醇, 填料下陷, 再填, 用與柱內(nèi)徑相同的頂端平滑的不銹鋼桿壓緊, 再填平, 滴甲醇, 再壓緊反復幾次, 直至裝滿填平。柱頭用甲醇沖洗干凈, 擦凈柱外壁的填料, 擰緊柱頭,用純甲醇沖洗30 分鐘以上。
問題二:峰面積重復性不佳。
原因:(1) 進樣閥漏液; (2) 加樣針不到位。
解決方法:處理對于第一種情況更換進樣閥墊圈; 對于第二種情況保證加樣針插到底,注射樣品溶液后須快速、平穩(wěn)地從LOAD 狀態(tài)轉(zhuǎn)換到INJ EC T 狀態(tài),以保證進樣量的準確。日常工作中, 液相色譜儀的保養(yǎng)非常重要, 如要注意不要讓空氣進入輸液系統(tǒng)和高壓泵中, 儲液器內(nèi)的溶液如長時間未用應清洗儲液器并更換溶液, 每次用完色譜儀后緩沖液要用純水沖洗干凈,防止無機鹽析出或沉積; 樣品的前處理也很重要,任何樣品都要盡可能地去除雜質(zhì), 完全溶解, 盡量減少對色譜柱的污染, 以延長色譜柱的使用壽命, 同時避免注射過濃的樣品溶液, 以免殘留液在進樣閥內(nèi)析出固體引起堵塞; 色譜柱作好標記,用于不同分析目的的色譜柱不要混用等。
問題三:液相色譜中峰出現(xiàn)拖尾或出現(xiàn)雙峰的原因是什么?
原因:1.篩板堵塞或柱失效 2.存在干擾峰
解決辦法:對于第一種情況可以反向沖洗柱子,替換篩板或更換柱子;對于第一種情況解決辦法為使用較長的柱子,改換流動相或更換選擇性好的柱子。
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