隨著納米技術(shù)的快速發(fā)展,越來越多的新型納米材料不斷出現(xiàn)并迅速應(yīng)用在實(shí)際生活中。因此,發(fā)展快速、高通量的生物檢測手段對納米毒性的快速安全評估極為重要。流式細(xì)胞術(shù)是毒理學(xué)檢測的常用技術(shù),具有高通量、快速、準(zhǔn)確的特點(diǎn)。但由于團(tuán)聚的納米材料在尺寸上同細(xì)菌相近,嚴(yán)重干擾檢測結(jié)果,使得流式細(xì)胞術(shù)難以運(yùn)用于納米材料對細(xì)菌的毒性評估。
近期,中國科學(xué)院合肥物質(zhì)科學(xué)研究院技術(shù)生物與農(nóng)業(yè)工程研究所吳李君、陳少鵬課題組建立了基于PI-GFP雙熒光標(biāo)記的納米材料細(xì)菌毒性檢測方法:GFP綠色熒光表征細(xì)菌的生長,碘化丙啶PI紅色熒光標(biāo)記區(qū)分死、活細(xì)胞,在流式細(xì)胞儀上準(zhǔn)確區(qū)分細(xì)菌與納米材料,通過綠色熒光和紅色熒光細(xì)胞的相對比例,反應(yīng)納米材料的毒性。對比單熒光標(biāo)記,雙熒光標(biāo)記可以更準(zhǔn)確地檢測納米材料的毒性。運(yùn)用上述建立的雙熒光報(bào)告系統(tǒng),他們研究了水環(huán)境中金屬離子及表面活性劑對納米銀毒性的影響,揭示了不同環(huán)境因子對納米銀細(xì)菌毒性的影響和機(jī)制。結(jié)果表明,雙熒光報(bào)告檢測系統(tǒng)可以較準(zhǔn)確地反應(yīng)納米材料的毒性,適用于環(huán)境納米材料生物學(xué)效應(yīng)的評估。該研究成果已被國際毒理學(xué)期刊Cheomsphere (DOI: 10.1016/j.chemosphere.2016.04.074)接收。
該研究受到國家重大研究計(jì)劃、中科院先導(dǎo)專項(xiàng)B、國家自然科學(xué)基金以及研究院院長基金資助。
雙熒光報(bào)告基因系統(tǒng)檢測納米銀生物毒性
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