“膜” 法學(xué)院之常見(jiàn)問(wèn)題解決篇—困擾多時(shí)的問(wèn)題都有解答了!

作者: 2018年07月17日 來(lái)源:全球化工設(shè)備網(wǎng) 瀏覽量:
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上期我們?yōu)槟榻B了如何根據(jù)您的實(shí)驗(yàn)需求選擇合適的超濾管,本期我們總結(jié)了超濾管使用過(guò)程中經(jīng)常遇到的問(wèn)題,分析問(wèn)題產(chǎn)生的原因并給您一個(gè)完美的解決方案。超濾膜一次使用就碎了?可能和我們的離心機(jī)有關(guān)系超濾管如

上期我們?yōu)槟榻B了如何根據(jù)您的實(shí)驗(yàn)需求選擇合適的超濾管,本期我們總結(jié)了超濾管使用過(guò)程中經(jīng)常遇到的問(wèn)題,分析問(wèn)題產(chǎn)生的原因并給您一個(gè)完美的解決方案。

 

超濾膜一次使用就碎了?可能和我們的離心機(jī)有關(guān)系

 

超濾管如果離心轉(zhuǎn)速過(guò)高,可能會(huì)導(dǎo)致膜甚至管子的破裂。離心機(jī)的轉(zhuǎn)速與離心機(jī)的半徑以及離心力都有關(guān)系,不同半徑的離心機(jī),相同轉(zhuǎn)速出來(lái)的離心力也不一樣,可以公式換算!說(shuō)明書(shū)中明確指出使用超濾管的最大轉(zhuǎn)速和離心力,做實(shí)驗(yàn)時(shí)要根據(jù)不同品牌的超濾管調(diào)整到離心力的承受范圍內(nèi)。另外,超濾管在離心機(jī)中的擺放也是有講究的,使用角轉(zhuǎn)子時(shí),超濾管放置方式要求印有刻度一側(cè)朝上|朝外(這樣雙面膜才能發(fā)揮切向流的作用),使用水平轉(zhuǎn)子沒(méi)有特殊要求;要不也會(huì)發(fā)生破裂哦~在濃縮管中加入樣品,不得超過(guò)最大體積。(以Turbo15 為例,若使用水平轉(zhuǎn)子不得超過(guò)15ml 樣品,若角轉(zhuǎn)子則9ml

 

 

雙面垂直膜--窗口朝上

單面垂直膜--刻度面朝上

 

另外,還要注意的是,離心15ml或是50ml外管的超濾管zui好使用尖底的轉(zhuǎn)子,因?yàn)槌瑸V管的底部是尖底的。如果使用圓底的轉(zhuǎn)子,有可能無(wú)法把樣品管放滿(mǎn),或是會(huì)增加外管底部磨損破損的幾率。

 

脫鹽濃縮,一個(gè)超濾管就可以搞定

濃縮用超濾管,脫鹽用透析袋或脫鹽柱,這是很多實(shí)驗(yàn)室一直沿用的實(shí)驗(yàn)操作。其實(shí)呢,超濾管做“脫鹽+濃縮”,也是很多蛋白操作高手的小訣竅。而如果你的樣品量有幾十毫升甚至幾升,選擇賽多利斯的超濾膜包會(huì)在一小時(shí)之內(nèi)完成自動(dòng)換液,非常的方便哦!

另外,賽多利斯的超濾管也有針對(duì)于換液的特殊設(shè)計(jì):

a.加2ml樣品到濃縮管

b.清空濾過(guò)管

c.插入滲濾小管到濃縮管,加入10ml去離子水或是緩沖液。旋上蓋子

d.重復(fù)濃縮步驟,會(huì)有98%的無(wú)機(jī)鹽濾過(guò)

e.去除滲濾小管,回收濃縮后的樣品

 

 

我用濃縮后的蛋白做下游分析時(shí)發(fā)現(xiàn)有干擾,可能原因

 

超過(guò)濾薄膜含有微量甘油和NaN3。 如果此材料干擾分析,可用緩沖液或去離子水預(yù)清洗。如果干擾仍然存在,用0.1 N NaOH清洗,然后用緩沖液或去離子水再次清洗后甩干。同樣需要強(qiáng)調(diào)的是,如果用NaOH處理,可能會(huì)對(duì)RC膜有一定影響,所以,盡量選擇PES膜并且避免過(guò)夜浸泡。

 

Vivaspin超濾管系列具有專(zhuān)利的尖角死體積樣品安全保護(hù)技術(shù),防意外甩干,給珍貴的樣品更多一道保障!另外,根據(jù)蛋白的分子量和體積的不同,Vivaspin系列有多達(dá)24種不同選擇。樣品處理體積包括從100μl20ml,截留分子量也涵蓋了2KDa0.2um

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